荧光免疫层析技术是将免疫学方法(抗原抗体特异性结合)与荧光微球标记技术结合起来的方法。以双抗体夹心测抗原为例，将检测抗体与荧光微球偶联，制备成荧光垫；将另外不同表位的抗体固定于硝酸纤维素膜（NC膜）上，作为捕获抗体。加入的待测样本如果有目标抗原，目标抗原首先与荧光垫上偶联有荧光微球的检测抗体结合，在毛细管作用下向硝酸纤维素膜（NC膜）区域移动，被硝酸纤维素膜上的抗体捕获，形成抗体（偶联荧光微球）-抗原-抗体复合物，通过检测荧光微球的信号强度，计算出目标抗原的含量。